伪狂犬病病毒gD基因与沙门氏菌Flagellin基因融合表达及免疫原性评价

作者：田昌海; 喻晓航; 丁彦彬; 邬雅丽; 刘一宁; 缪葭皓; 谭骞龙; 罗烨; 余兴龙^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 1-10.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20230512.002

• 伪狂犬病毒
• 糖蛋白D
• 沙门氏菌鞭毛蛋白
• 免疫原性

为了探究沙门氏菌Flagellin基因作为分子佐剂的作用，同时评价伪狂犬病病毒（PRV）gD糖蛋白与Flagellin融合表达蛋白的免疫原性。根据真核细胞HEK-293F密码子偏好，对PRV流行毒株的gD基因进行优化，优化后与合成的沙门氏菌鞭毛蛋白Flagellin基因（GenBank：AAB33952.1）通过连接肽（EAAAK）连接，并分别克隆至真核表达载体pTT5，得到pTT5-gD和pTT5-gD-Flagellin重组质粒，转染至HEK-293F细胞中进行表达。经Western Blot与SDS-PAGE检测后，将亲和层析纯化的gD与gD-Flagellin蛋白分别与ISA VG 201佐剂乳化，免疫小鼠。对小鼠的血清特异性抗体与中和抗体进行检测，并进行攻毒实验。结果显示，gD-Flagellin重组蛋白能产生较高水平的特异性抗体并对小鼠有较好的免疫保护效果。使用变异毒株PRV-XiangA攻毒后，gD-Flagellin组小鼠存活率为100%，gD组和商品化灭活苗组小鼠存活率均为50%，control组小鼠全部死亡。本研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研发及该病的防制提供了参考依据。

• 单位
  湖南农业大学