高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因的原核表达

作者：**明; 刘永刚; 王淑杰; 武嘉男; 石文达; 李丽琴; 荣福龙; 蔡雪辉

来源：动物医学进展, 2010, (08): 8-11.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2010.08.006

• 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒
• ORF3蛋白
• 原核表达
• 抗原性 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
• ORF3 gene
• prokaryotic expression
• antigenicity

为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白的结构、功能及免疫学特性,根据GenBank中已发表的高致病性PRRSV HuN4株ORF3基因序列,设计合成扩增PRRSV ORF3基因的引物。将扩增的基因克隆到表达载体pProEx HTb中,转化到大肠埃希菌BL21进行表达。Western blot分析表明,GP3蛋白在大肠埃希菌中获得正确表达,且具有良好的反应活性。将纯化的GP3蛋白免疫小鼠制备抗GP3多克隆血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价,结果在小鼠体内产生较高滴度的特异性抗体,证明PRRSV GP3蛋白具有良好的抗原性。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室