腺病毒介导GFP基因标记人脂肪来源干细胞可行性研究

作者：阳水发; 易阳艳; 黄艳; 吴舒; 王朝慧

来源：中国美容整形外科杂志, 2016, 27(08): 495-498.

• 脂肪来源干细胞
• 腺病毒
• 绿色荧光蛋白
• 标记
• 转染

目的研究腺病毒介导绿色荧光蛋白(GFP)基因标记人脂肪来源干细胞(ADSCs)的可行性。方法通过酶消化法获取人ADSCs,采用流式细胞术检测表面标记物以及成脂分化诱导进行鉴定。将Ad-GFP通过不同感染复数(MOI分别为25、50、100)转染ADSCs,观察各组转染效率,找出最适合的转染条件。观察GFP标记ADSCs后随时间衰减速率,确定标记效果的维持时间。结果获取的细胞高表达CD49d、CD90、CD105,不表达CD34、CD45、CD106,经成脂诱导2周现脂滴,油红O染色成红色,符合ADSCs的多种特性。MOI分别以25、50、100转染后,转染效率分别为(77.3±4.2)%、(94.7±3.2)%、(96.3±3.0)%,MOI=50为转染的适宜条件。GFP标记ADSCs后,在2周内的标记率仍可高达55.0%,至4周后则衰减至17.0%。结论本研究提示通过腺病毒能够高效地介导GFP基因导入ADSCs,快速表达出蛋白产物,维持24周的标记示踪效果。

• 单位
  南昌大学第二附属医院