猪FMDV受体β3亚基配体结合域的基因克隆及其多克隆抗体制备

作者：独军政; 高闪电; 常惠芸; 丛国正; 林彤; 邵军军; 刘湘涛; 才学鹏

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2008, (04): 358-361.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004630

• FMDV病毒受体
• 猪β3LBD基因
• 原核表达
• 多克隆抗体 FMDV receptor
• ligand binding domain cDNA of porcine β3
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

目的:克隆猪FMDV受体β3亚基的配体结合域(LBD)基因,利用原核细胞表达β3亚基的LBD片段,纯化目的蛋白后制备兔多克隆抗体。方法:利用RT-PCR方法从FMDV实验感染猪的肺组织中克隆β3亚基的LBD基因,将其与pGEMT-easy载体相连构建pGEM/β3 LBD,经BamHⅠ/XhoⅠ酶切后回收β3LBD片段,与同样酶切处理的原核表达载体pGEX4T-1相连,构建原核表达质粒pGEX/β3 LBD,将其转化感受态细胞BL21(DE3),以IPTG诱导表达β3LBD蛋白。纯化目的蛋白后免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。通过ELISA和Western blot鉴定血清效价和特异性。结果:猪β...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所