摘要

目的探讨miR-375在骨关节炎软骨中的表达及对软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法选择60例行膝关节置换术患者的骨关节炎软骨组织标本,另选择20例正常软骨组织作为对照。采用酶两步消化法获取并原代培养骨关节软骨细胞,利用Lipofectamine 2000分别将miR-375 inhibitor和miR-375 NC转染至软骨细胞,并分为miR-375 inhibitor组、阴性对照组和空白对照组。qRT-PCR法检测软骨组织及骨关节软骨细胞中miR-375的表达水平; MTT法检测各组细胞的增殖活力;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率; qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组细胞中Bcl-2、Cleaved Caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平。结果 miR-375的表达水平在骨关节炎软骨组织中要明显高于正常软骨组织(P <0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-375 inhibitor组miR-375表达水平明显降低(P <0.05);各时段的增殖能力减弱、凋亡率增加(P <0.05); Bcl-2mRNA及蛋白表达水平均降低(P <0.05),Cleaved Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P <0.05)。结论 miR-375在骨关节炎软骨组织中高表达,降低miR-375的表达能抑制骨关节软骨细胞的增殖能力,促进其凋亡,其作用机制可能与影响Bcl-2、Cleaved Caspase-3表达水平有关。

  • 单位
    新疆医科大学第六附属医院; 新疆医科大学第一附属医院