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摘要
地西泮结合抑制因子(Diazepam binding inhibitor, DBI)与酰基辅酶A具有高亲和力，在动物组织中广泛存在，与脂肪酸代谢、类固醇激素合成密切相关。为研究DBI基因的分子特征及该基因在乳腺发育中的作用，对牦牛DBI基因编码区进行克隆，进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR (Quantitative real-time PCR, qPCR)、蛋白免疫印迹技术(Western blotting, WB)和免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC)方法对牦牛泌乳前期、泌乳期和干乳期的乳腺组织中DBI的相对表达量和表达部位进行研究。DBI序列分析显示：牦牛DBI基因编码区序列长264 bp，编码87个氨基酸残基，与牛的同源性高达99.62%;qPCR数据表明：牦牛泌乳前期乳腺组织中DBI基因的相对表达量显著高于泌乳期和干乳期(P <0.05);WB结果显示：牦牛泌乳前期乳腺组织中DBI蛋白的表达量最高，干乳期次之，泌乳期最低(P <0.05);IHC结果表明：不同发育时期的牦牛乳腺组织中DBI的表达部位并无明显差异，主要表达于乳腺腺泡上皮细胞、导管上皮细胞及小叶间质细胞。DBI在不同发育时期牦牛乳腺组织中的相对表达量具有明显差异(P <0.05)，揭示DBI可能参与牦牛乳腺发育的过程，这为进一步探究DBI基因在生物体中的作用提供相应的理论参考。
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