敲低EN2诱导肝癌细胞凋亡并提高PTEN蛋白的表达

作者：杨启; 万春^*; 吕新远

来源：肿瘤防治研究, 2019, 46(04): 316-321.

• 肝癌细胞
• EN2
• PTEN
• 凋亡

目的探讨EN2对肝癌细胞凋亡及细胞中PTEN蛋白表达的影响。方法用EN2 siRNA慢病毒感染肝癌细胞HuH-7,qRT-PCR和Western blot方法检测干扰效果。MTT方法测定细胞活力变化,PI单染法测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法测定细胞凋亡变化,Western blot测定细胞中激活型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、激活型Caspase-9(Cleaved Caspase-9)、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)及细胞周期素B 1(Cyclin B 1)蛋白水平,JC-1法测定线粒体膜电位变化,Western blot测定胞浆中细胞色素C(Cytochrome C)蛋白水平。结果 EN2 siRNA慢病毒感染可明显下调肝癌细胞中EN2的表达。沉默EN2表达后的肝癌细胞活力降低,细胞凋亡率升高,细胞G2/M期比例升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、PTEN蛋白水平明显升高,Cyclin B1蛋白水平明显降低,线粒体膜电位下降,胞质中Cytochrome C蛋白水平升高。结论敲低EN2可以阻滞肝癌细胞周期,诱导肝癌细胞凋亡,其作用机制可能与PTEN、线粒体凋亡途径有关。

• 单位
  南阳市中心医院