二硫键氧化还原异构酶(DsbM)与转录调控因子(PA0056)的相互作用

作者：韩笑; 刘宇杰; 马逸冰; 徐海津; 乔明强^*

来源：南开大学学报(自然科学版), 2019, 52(03): 1-6.

• 二硫键氧化还原酶
• 转录调控因子
• 酵母双杂交
• 双分子荧光互补
• 铜绿假单胞菌

二硫键氧化还原异构酶(disulfide oxidoreductase,DsbM)分布于原核细胞中,主要参与周质空间中膜蛋白的折叠.转录调控因子(lysR type transcriptional regulator,PA0056)是一类包含4个半胱氨酸的蛋白,当以氧化态形式存在时,可调控下游基因的转录,参与调节抗氧化或者抗药性.本实验室前期研究证明DsbM参与氨基糖苷类耐药性的调节.关注铜绿假单胞菌中DsbM和PA0056之间的相互作用,分别构建了酵母双杂交(yeast two-hybrid test)和双分子荧光互补系统(bi-molecular fluorescence complementation, BiFC)的载体.通过酵母双杂交实验,发现DsbM和PA0056之间存在较强的蛋白质相互作用.通过BiFC实验,发现共同转化表达DsbM和PA0056载体的酵母中可观察到强烈的黄色荧光,表明DsbM和PA0056可以发生相互作用.本研究为深入研究DsbM在铜绿假单胞菌耐氨基糖苷类抗生素耐药机制奠定基础.

• 单位
  南开大学