MiR-30b通过靶向CCL22调控人NK/T细胞淋巴瘤细胞株SNK-6和YTS顺铂耐受的研究

作者：王健红; 刘芳; 段晓辉; 郝彩霞; 刘祥祥; 鲁英娟; 王哲; 梁蓉^*

来源：中国实验血液学杂志, 2019, 27(06): 1838-1844.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.06.021

• miR-30b
• 顺铂耐受
• 巨噬细胞来源的趋化因子
• NK/T细胞淋巴瘤

目的:探讨miR-30b对人NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受的调控及其作用机制。方法:培养正常NK细胞以及SNK-6和YTS细胞,应用real-time PCR法和Western blot分别检测miR-30b和巨噬细胞来源的趋化因子(CCL22)mRNA和蛋白的表达。以miR-30b过表达和miR-30b抑制剂分别转染SNK-6和YTS细胞,MTT法检测SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受性的影响;caspase-3试剂盒检测caspase-3活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平。双荧光素酶报告基因检测miR-30b与CCL22的靶向关系。Western blot法检测CCL22表达,评估CCL22对细胞耐受性和caspase-3活性的影响。结果:与正常NK细胞相比,SNK-6和YTS细胞中miR-30b表达均显著降低(P <0.01),CCL22 mRNA表达均显著升高(P <0.01)。miR-30b过表达可降低细胞活性,顺铂耐受性显著降低(P <0.05),细胞凋亡比例显著增高(P <0.05),Caspase-3活性增加(P <0.05)。miR-30b抑制剂作用与miR-30b过表达作用相反。荧光素酶活性分析显示,miR-30b过表达显著降低荧光素酶报告基因的荧光强度,而结合位点突变后荧光素酶活性不变,表明CCL22是miR-30b的直接靶分子。此外,miR-30b过表达显著降低CCL22表达(P <0.05)。而CCL22过表达可增加SNK-6细胞活性,降低Caspase-3活性,逆转miR-30b的作用,增加对顺铂的耐受性。结论:miR-30b可通过靶向CCL22抑制人NKTCL SNK-6和YTS细胞的顺铂耐受性。

• 单位
  西京医院; 中国人民解放军空军军医大学