高糖对肾脏固有细胞蛋白泛素化修饰及内质网应激的影响

作者：王奕蔓; 梁伟; 丁国华; 陈铖

来源：中华肾脏病杂志, 2017, 33(04): 271-277.

• 糖尿病肾病
• 内质网应激
• 足细胞
• 泛素化

目的观察糖尿病小鼠中肾脏固有细胞(足细胞、近端肾小管上皮细胞)的泛素化修饰和内质网应激的情况。方法建立链脲菌素小鼠糖尿病模型,成模16周后取肾组织,免疫荧光法检测泛素化蛋白和内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白94(GRP94)在肾脏不同区段的表达和分布。流式细胞术分离培养原代小鼠足细胞和近曲小管上皮细胞,高糖(30 mmol/L)刺激不同时间(1 d、3 d、7 d),Western印迹检测蛋白泛素化蛋白和GRP94蛋白的表达。结果糖尿病小鼠出现微量蛋白尿和轻度系膜区增宽,泛素化蛋白在肾小球主要分布于足细胞,并散在分布于肾小管上皮(近端、远端)的胞质和胞核,糖尿病组肾小球和近端肾小管的泛素化蛋白表达均高于对照组(均P<0.05)。高糖刺激后,原代足细胞和近曲小管上皮细胞泛素化蛋白均呈时间依赖方式升高,刺激3 d、7 d高糖组均高于正常糖组(均P<0.05)。GRP94散布在肾小球和肾小管,糖尿病组肾小球GRP94表达均高于对照组(P<0.05),但近端肾小管GRP94表达与对照组差异无统计学意义。足细胞GRP94表达在高糖刺激后随时间延长而升高,3 d、7 d时高糖组与正常糖组差异均有统计学意义(均P<0.05);近曲小管上皮细胞在高糖刺激后GRP94未发生明显变化,与正常糖组比较差异无统计学意义。结论高糖可诱导肾组织蛋白泛素化水平增加。而足细胞内的蛋白质代谢失衡和内质网应激可能参与糖尿病肾病早期足细胞损伤。

• 单位
  武汉大学人民医院