HA117调节DPF3表达对神经母细胞瘤分化的影响

作者：吴欢; 金先庆; 李爽爽; 刘行; 滕银平; 李力

来源：中华小儿外科杂志, 2017, 38(06): 441-445.

• 神经母细胞瘤
• 基因表达
• 分化

目的探讨HA117及DPF3在儿童神经母细胞瘤(NB)中的表达及意义,及其对NB分化的影响和可能机制。方法运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组化法检测HA117、DPF3在35例NB、8例节细胞神经母细胞瘤(GNB)和10例神经节细胞瘤(GN)中的表达水平。构建HA117过表达和空载慢病毒,分别转染SH-SY5Y细胞株,构建HA117过表达组和对照组。采用qRT-PCR和Western Blot检测HA117和DPF3的RNA和蛋白质表达水平。采用10μmol/L维甲酸诱导HA117过表达组和对照组细胞,普通光学显微镜观察细胞形态,免疫荧光法检测神经特异性标志物MAP2蛋白质表达,Western Blot检测HA117过表达组和对照组细胞MAP2、NSE蛋白质的表达情况。结果 HA117的RNA在NB中的相对表达量为30.14±15.96,明显高于GNB/GN的1.03±0.37(P<0.05),DPF3的mRNA在NB中的表达量为0.81±0.17,明显低于GNB/GN的3.14±1.09(P<0.05),与HA117的表达趋势相反。免疫组化检测发现DPF3在GNB/GN中呈强阳性表达,在分化中的NB中呈弱阳性表达,在未分化/分化差的NB中呈阴性表达。过表达HA117可在mRNA和蛋白水平明显下调SH-SY5Y中DPF3的表达。经10μmol/L维甲酸诱导7 d后,对照组细胞生长明显减慢,细胞长出突起,发生神经元样分化;HA117过表达组SH-SY5Y的MAP2、NSE的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论 HA117和DPF3的表达可能与NB的分化相关,HA117可能通过下调DPF3的表达抑制NB的分化。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院