摘要
目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)外泌体(Exo)对髁突软骨细胞的细胞增殖、细胞周期及相关基因表达的影响。方法获取大鼠BMSC和髁突软骨细胞。收集第三代BMSC培养72 h上清液,采用超速离心法提取Exo。实验组使用外泌体(BMSC-Exo)进行髁突软骨细胞培养,对照组使用低糖培养基进行髁突软骨细胞培养。细胞计数(CCK-8)法检测髁突软骨细胞的增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期改变情况,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析第7天及第14天髁突软骨细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)基因表达。采用独立样本t检验进行统计学分析。结果CCK-8结果显示,培养72 h后实验组细胞增殖活力(4.72±0.58)高于对照组(2.91±0.17),差异有统计学意义(t=16.13,P<0.001);流式细胞仪显示,Exo促进髁突软骨细胞G1期转换为G2期;RT-PCR结果显示:第7天实验组ColⅠ表达增量(2.85±0.14)高于对照组(1.00±0.17),差异有统计学意义(t=13.41,P<0.001),第14天实验组ColⅠ表达增量(5.34±0.17)高于对照组(3.14±0.10),差异有统计学意义(t=14.25,P<0.001),第14天实验组ColⅡ表达增量(1.77±0.13)高于对照组(1.35±0.18),差异有统计学意义(t=3.52,P=0.041)。结论大鼠骨髓间充质干细胞外泌体可以促进髁突软骨细胞增殖,还能促进髁突软骨细胞的ColⅠ、ColⅡ表达。
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