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摘要
目的 纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒 (KSHV)潜伏相关核抗原 (LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性。方法 含重组质粒pGEX 6p 1+ORF73C(pORF73C)的宿主菌BL2 1经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。用glutathioneSepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后 ,以重组 3C蛋白酶对融合蛋白进行解离 ,SDS PAGE对表达及纯化产物进行鉴定。以纯化的ORF73C蛋白免疫小鼠获得抗血清 ,建立ELISA检测其免疫原性。结果 SDS PAGE显示蛋白条带大小分别为 4 90 0 0和 2 30 0 0 ,与预期的ORF73C融合蛋白及ORF73C蛋白分子量大小一致 ;ELISA检测显示 ,抗ORF73C多抗免疫反应性高于未免疫小鼠血清 2倍以上。结论 成功获得了纯化的ORF73C蛋白 ,经ELISA显示其有较强免疫原性。
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