摘要

目的探讨微小RNA(miR)-216a-5p在妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘中的表达及其对滋养层HTR-8/SVneo细胞侵袭、迁移的影响及可能机制。方法收集2018年10月至2019年10月烟台市烟台山医院的28例GDM孕妇(GDM组)和28例正常孕妇(对照组)胎盘组织, 将体外培养HTR-8/SVneo细胞分为空白组(正常培养)、模拟物(mimics)-NC组(转染mimics-NC)和miR-216a-5p mimics组(转染miR-216a-5p mimics), 采用实时荧光定量PCR检测胎盘组织和各组HTR-8/SVneo细胞中miR-216a-5p表达水平, Transwell实验检测各组HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移, 免疫印迹法(Western blot)检测各组HTR-8/SVneo细胞中E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指E盒结合蛋白-1(ZEB1)和N-钙黏附分子(N-cadherin)蛋白表达, 双荧光素酶报告基因实验检测miR-216a-5p和ZEB1的靶向关系。结果与对照组比较, miR-216a-5p在GDM组胎盘组织中表达明显升高(2.86±0.35 vs 0.96±0.07,P<0.05);与mimics-NC组比较, miR-216a-5p mimics组细胞中miR-216a-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高[(1.01±0.08)vs(22.48±3.26), (0.25±0.03)vs(0.68±0.05)], 而细胞侵袭、迁移能力和细胞中Vimentin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达水平明显降低[(106.83±9.35)vs(59.16±5.28), (205.48±18.25)vs(87.32±6.50), (0.65±0.05)vs(0.35±0.02), (0.55±0.04)vs(0.32±0.03), (0.50±0.03)vs(0.36±0.02)](P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-216a-5p可与ZEB1靶向结合。结论 miR-216a-5p在GDM患者胎盘组织中表达上调, 可能通过靶向调控ZEB1表达抑制滋养层HTR-8/SVneo细胞转移。

  • 单位
    烟台市烟台山医院