一个特殊的顺式发夹核酶对感染烟草原生质体的影响

作者：王慧; 林志新; 孙庆申; 吴立刚; 范济华; 许政

来源：上海交通大学学报, 2004, 38(05): 810-814+818.

DOI：10.3321/j.issn:1006-2467.2004.05.037

• 烟草花叶病毒
• 发夹核酶
• 绿色水母荧光蛋白
• 烟草原生质体
• 转染

研究一个烟草花叶病毒(TMV)cDNA3′末端被特异切割的发夹核酶对感染原生质体的作用.选用一个外源基因绿色水母荧光蛋白(GFPuv)作为报道基因,取代了大部分的CP编码区域,以研究在烟草原生质体中发夹核酶对TMV载体的复制,通过GFP的表达来确定表达量.顺式发夹核酶对TMV载体感染效率的影响通过体外转录来观察.TMVGFPRIB体外转录感染原生质体的效率比与其不含该核酶的对应物的感染效率高3～5倍.Northern杂交结果表明,包括核酶在内的3′末端非病毒序列在体外转录反应开始后就被顺式发夹核酶切除了.当直接用载体DNApST-MVGFPRIB感染原生质体时,感染原生质体的数量比与之相对应的pSTMVGFPNOS感染原生质体数多50%～80%.

• 单位
  上海交通大学; 生命科学技术学院; 中国科学院植物生理生态研究所