摘要

目的 探索乳猪肝细胞的冻存以及培养条件和方法。方法 采用两步法分离乳猪肝细胞 ,液氮冻存 4个月后复苏 ,与鼠尾胶原液混合后接种培养 ,或将肝细胞接种于胶原被覆的培养瓶中 ,然后被覆上第 2层胶原培养 ,观察培养细胞的形态、白蛋白mRNA的表达、尿素合成及天冬氨酸氨基转移酶 (AST)的漏出量等。结果 冻存肝细胞的活性维持较好 ,并成功地被固定于混合凝胶或三明治形凝胶中 ,较好地保持了尿素合成以及白蛋白mRNA表达能力。结论 此冻存条件适合于猪肝细胞的长期保存 ,胶原凝胶可为肝细胞提供更接近体内的培养环境 ,较好地维持了肝细胞的功能和形态学特征。

  • 单位
    第三军医大学西南医院; 解放军第302医院