miR-939-5p调控22基因表达对肝癌迁移和增殖的影响

作者：曹玉刚; 夏国兵; 郭浚; **^*

来源：国际外科学杂志, 2019, 46(02).

• 肝肿瘤
• 细胞迁移分析
• 细胞增殖
• 微小RNA
• 泛素特异肽酶22

目的探讨miR-939-5p对泛素特异肽酶22(USP22)基因表达的调控作用及对肝癌迁移和增殖的影响。方法采用荧光定量PCR(qPCR)检测肝癌细胞株(HepG2、MHCC-97H、SMMC-7721、BEL-7404和Huh7)和正常肝细胞株LO2中miR-939-5p的表达。以表达量最低的肝癌细胞为实验对象,转染miR-939-5p(实验组)或miR-NC(对照组)。qPCR检测miR-939-5p的转染效率。Transwell迁移实验和四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)增殖实验检测miR-939-5p对肝癌细胞迁移和增殖能力的变化。生物信息学软件预测miR-939-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因验证miR-939-5p与靶基因的相互作用。qPCR和Western blotting检测高表达miR-939-5p后靶基因在mRNA和蛋白水平的表达。计量数据以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验。结果肝癌细胞株中miR-939-5p的表达均明显低于正常肝细胞(P<0.01),SMMC-7721细胞中miR-939-5p的表达最低(P<0.01)。miR-939-5p可有效转染进入SMMC-7721细胞内[(1.01±0.07)比(20.12±1.27),P<0.01]。高表达miR-939-5p可抑制肝癌SMMC-7721细胞的迁移能力(P<0.01)和增殖能力(P<0.05)。USP22基因可能为miR-939-5p的靶基因。荧光素酶报告基因证实miR-939-5p能与USP22 mRNA的3′-UTR特异性结合(P<0.01)。高表达miR-939-5p后USP22在mRNA和蛋白水平上表达降低(P<0.01)。结论 miR-939-5p在肝癌细胞株中表达降低,可抑制肝癌SMMC-7721细胞的迁移和增殖能力,其分子机制为靶向干扰USP22基因的表达。

• 单位
  黄石市中心医院