摘要
目的构建IGF-1a,并将其表达及纯化。方法用多重PCR技术获得人IGF-1a基因,采用酶切与连接的方法,将其连接至pET28a载体,用IPTG诱导转化pET28a-Cpn10-IGF-1a表达载体的大肠杆菌,以镍金属鳌合亲和层析法纯化融合蛋白质。结果构建了IGF-1a的表达载体pET28a-Cpn10-IGF-1a,DNA序列测定结果表明构建正确;以镍金属鳌合亲和层析获得纯度为98%的蛋白质。结论用分子克隆技术正确克隆IGF-1a,并成功表达与纯化IGF-1a蛋白。
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单位吉林大学; 吉林大学第一医院