基于Tet-On Advanced的肺癌细胞15-脂氧化酶-2基因表达载体的构建与表达

作者：杨玉花; 魏晓莉; 郑建全

来源：生物技术通讯, 2013, (01): 45-48.

• 15-脂氧化酶-2
• Tet-On Advanced系统
• 肺癌
• A549细胞 15-lipoxygenase-2
• Tet-on Advanced system
• lung cancer
• A549 cell

目的:构建肺癌细胞15-脂氧化酶-2(15-Lox-2)的可诱导性真核表达载体pTRE-Tight-15-Lox-2,并在肺癌细胞中检测其是否可受强力霉素(DOX)诱导表达。方法:pcDNA3-15-LOX-2载体经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切线性化,回收15-LOX-2 cDNA片段,将其克隆入pTRE-Tight载体的EcoRⅠ和XbaⅠ位点;采用脂质体法将pTet-On-Advanced与构建的pTRE-Tight-15-Lox-2共转染肺腺癌A549细胞,DOX诱导表达后,Western印迹检测15-Lox-2的表达水平。结果:构建了pTRE-Tight-15-Lox-2诱导表达载体;W...

• 单位
  军事医学科学院毒物药物研究所; 中国航天员科研训练中心