摘要

为了研究微管解聚酶KIF2A如何参与葡萄糖、棕榈酸诱导的结肠癌HCT116细胞中心体扩增,该实验使用葡萄糖(Glu,25 mmol/L)、棕榈酸(Pal,150 μmol/L)处理HCT116细胞后,再使用ROCK1抗体免疫沉淀其相互作用蛋白,并将沉淀结果通过高通量质谱HPLC/MS鉴定。通过Western blot、siRNA、免疫荧光验证ROCK1的相互作用蛋白。结果显示,在葡萄糖、棕榈酸共同处理后,中心体定位的ROCK1可结合中心体蛋白定位的微管解聚酶KIF2A。敲降KIF2A的表达可降低葡萄糖、棕榈酸诱导的中心体扩增率。生物信息学分析显示,癌组织KIF2A的mRNA表达水平较健康组织显著增加(健康组织3.275±0.385,Stage I 4.460±0.682,Stage II 4.436±0.620,Stage III 4.365±0.680,Stage IV 4.442±0.555,P<0.01),不同临床分期的结肠癌组织中KIF2A的表达量无显著差异。KIF2A的低表达与结肠癌的不良预后呈正相关(中位生存期为低表达1 765天vs高表达3 042天)。综上所述,ROCK1-KIF2A通路在葡萄糖、棕榈酸诱导的中心体扩增中起到了关键作用,为糖尿病相关的结肠癌综合防治提供了实验依据。