DNMT3a在氢醌致造血干细胞毒性中的作用研究

作者：武坤; 聂波; 杨金荣; 贺振新; 程沈菊; 李艳红; 晋臻^*; 史明霞^*

来源：中国实验血液学杂志, 2022, 30(02): 607-612.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022.02.047

• 造血干细胞
• DNMT3a
• 氢醌
• PARP-1
• 形态
• 凋亡

目的:探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3a)在氢醌(HQ)致造血干细胞毒性中的调控作用及其机制。方法:人造血干细胞HSPC-1随机分为4组，A组：正常HSPC-1;B组：HQ干预HSPC-1;C组：B组+转染pcDNA3空载体；D组：B组+pcDNA3-DNMT3a。采用RT-qPCR法检测DNMT3a、PARP-1 mRNA表达情况；免疫印迹法检测DNMT3a、PARP-1蛋白表达水平。显微镜下观察细胞形态；MTT、流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡率。结果:与A组相比，B组细胞DNMT3a mRNA及蛋白表达降低、PARP-1 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05);C组与B组相比上述指标差异无统计学意义(P>0.05);D组HSPC-1转染DNMT3a后，DNMT3a mRNA及蛋白水平较B组升高，PARP-1 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。各组细胞转染DNMT3a后继续培养24 h, A组HSPC-1高密度生长，呈现的单核融合生长，B组及C组HSPC-1数目减少、生长缓慢；与B组和C组相比，D组细胞生长速度加快。MTT分析显示，B组各时间点HSPC-1细胞活力均明显低于A组(P<0.05),与C组比较无明显差异(P>0.05);转染24、48、72 h后D组细胞活力均明显高于B组(P<0.05)。B组细胞凋亡率明显高于A组(P<0.001),与C组无显著差异(P>0.05),D组细胞凋亡率明显低于B组(P<0.001)。结论:DNMT3a可能参与氢醌所致造血干细胞损伤过程，氢醌细胞损伤作用的发挥可能与DNMT3a表达受抑后对PARP-1活性的调节有关。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院