摘要
背景:随着组织工程技术的飞速发展,单一的生物支架材料很难满足组织工程的需要,通过合适的方法将两种或多种类型的材料组合起来,可以得到性能更加优良的复合支架材料。目的:检测牙髓干细胞在壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料上的黏附与增殖情况。方法:(1)采用改良酶消化法分离提取C57乳鼠牙髓干细胞,传代培养至第3代,体外成脂成骨诱导分化对细胞进行鉴定;(2)制备壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料,测定其孔径及孔隙率;(3)将壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料与第3代小鼠牙髓干细胞共培养,以细胞直接接种于培养板底部作为对照组,MTT法检测细胞增殖情况;(4)扫描电镜观察壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料的形态,细胞黏附、增殖及基质分泌情况。结果与结论:(1)成功分离培养C57小鼠牙髓干细胞,经成脂成骨诱导分化后结果呈阳性;(2)壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料孔径为(105.32±22.10)μm,孔隙率为(87.714±1.276)%;(3)牙髓干细胞在壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料上的增殖曲线与对照组基本一致,均为"S"型,培养第4-8天实验组增殖速度显著快于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);(4)共培养第2天,细胞与壳聚糖-纤维蛋白原复合支架材料黏附紧密,生长状态良好,第4天,细胞明显开始增殖,体积增大,有丰富的细胞外基质,第6天,铺满于整个材料表面及空隙;(5)壳聚糖-纤维蛋白原复合材料是一种适宜牙髓干细胞黏附与增殖的支架材料。
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单位四川大学华西口腔医院; 新疆医科大学第一附属医院