乙型脑炎病毒可视化快速检测方法的建立

作者：邢国珍; 姬凯; 薛继初; 徐朝; 郑文明; 许君^*

来源：河南农业大学学报, 2019, 53(06): 912-917.

DOI：10.16445/j.cnki.1000-2340.20191120.012

• 乙型脑炎病毒
• E蛋白
• 环介导等温扩增技术(LAMP)
• RT-LAMP
• 特异性
• 灵敏度

利用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了简便、可靠的快速检测乙型脑炎病毒JEV(Japanese encephalitis virus)的可视化方法。根据Gen Bank数据库中JEV Henan-09-03毒株(Gen Bank ID:GQ336809.1) E蛋白序列,设计了3对特异性LAMP引物,建立Bst DNA Polymerase等温扩增体系,优化后的反应体系可高灵敏性、特异性检测JEV。本方法通过在扩增产物中加入SYBR Green I染料后用石蜡进行封闭,在可见光下根据反应液荧光的颜色深浅来判断JEV扩增阳性强弱。结果显示,该方法的灵敏度可达5copies·m L-1,且与其他病毒,如乙型肝炎病毒HBV(Hepatitis B virus,HBV)无交叉反应。

• 单位
  河南农业大学; 生命科学学院