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摘要
本发明公开了一种三维培养胚胎干细胞来源的外泌体及其在制备治疗肝纤维化疾病的药物中的应用。胚胎干细胞的三维培养方法包括以下步骤：用普兰尼克-F68预铺孔板；将人胚胎干细胞加入无钙镁PBS缓冲液清洗细胞,再加入细胞解离试剂GCDR,孵育后加入mTeSR～(TM)1培养基,吹打成单细胞悬液；在孔板中加入mTeSR～(TM)1培养基,然后接种单细胞悬液。本发明采用胚胎干细胞三维生长技术,高度模拟了人体细胞体内生理状态下的立体生长方式,让细胞在生理行为上与机体实际的生理环境更接近,这样状态下的细胞产生的外泌体在组成成分上与体内细胞生理状态下产生的外泌体一致或高度相似,其外泌体原始性和真实性得到保障。
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