真菌毒素降解酶在大肠杆菌中的表达及活性分析

作者：杨贤松; 李晨晨

来源：新乡学院学报, 2019, 36(09): 25-32.

• 玉米赤霉烯酮
• 脱氧雪腐镰刀菌烯醇
• pETDuet-1
• 玉米赤霉烯酮降解酶基因
• 脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解酶基因

为了使一种真菌毒素降解酶能够同时高效降解玉米赤霉烯酮(Zearaleonoe,ZEN)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol, DON)两种真菌毒素,将改造过的基因p ETDuet-1-101(玉米赤霉烯酮降解酶基因)-201(脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解酶基因)导入BL21受体细胞,使基因pETDuet-1-101-201能够在Trans5α受体细胞中克隆、在BL21受体细胞中表达,构建共表达质粒1个及表达菌株1株。PCR扩增获得目的片段并连入pETDuet-1载体质粒,转化Trans5α富集菌株,经菌落PCR验证阳性片段,培养正确菌株,再转化BL21表达型感受态,培养菌株经IPTG诱导。结果表明:DON的降解率为51.6%,ZEN的降解率为26.7%,证明菌株的蛋白表达对ZEN和DON毒素都有较好的降解能力。

• 单位
  蚌埠学院; 食品与生物工程学院