血清4型禽腺病毒夹心ELISA检测方法的建立

作者：梁思敏; 谢芝勋; 罗思思; 邓显文; 韦悠; 谢志勤; 李小凤; 万丽军; 范晴; 任红玉

来源：中国兽医科学, 2023, 53(04): 434-438.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0089

• 血清4型禽腺病毒
• 夹心ELISA
• 检测

为建立一种血清4型禽腺病毒（FAd V-4）夹心ELISA快速检测方法，本研究以FAdV-4多抗作为捕获抗体，FAdV-4 Penton蛋白单克隆抗体作为检测抗体，通过优化反应条件，建立了检测FAdV-4的夹心ELISA方法，对其进行特异性、敏感性、重复性检验和临床样品检测。方阵试验结果显示，FAdV-4多抗最佳稀释度为1∶2 000，单抗最佳稀释度为1∶32 000。该方法可特异性检测近年流行的高致病性FAdV-4毒株，而对之前的FAdV-4、其他血清型FAdV和常见禽病病原体不发生交叉反应。敏感性结果显示，该法对9.7×102TCID50/m L FAdV-4仍可检出。重复性结果显示，批内和批间试验的变异系数均小于5.0%。用建立的夹心ELISA方法与荧光PCR同时对100份肛口拭子样品进行检测，两者检测结果相符。上述结果表明，本研究建立的夹心ELISA检测方法特异性强、敏感性高、重复性好，可用于FAdV-4的大批量检测。

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所; 广西大学