DDR2调控LncRNA UCA1/miR-590-3p轴对骨关节炎软骨细胞炎症因子释放和MMPs表达的影响

作者：孙强; 张大伟^*; 陈永锋; 王华溢; 王远瑞; 王鹏; 宋和强; 贾鸿

来源：中国骨与关节杂志, 2023, 12(04): 278-284.

• 骨关节炎
• 盘状结构域受体2
• RNA,长链非编码
• 基质金属蛋白酶
• 炎症因子

目的 探讨盘状结构域受体(discoidin domain receptor,DDR2)调控长链非编码RNA-尿路上皮癌相关分子1 (long noncoding RNA-urothelial carcinoma antigen 1,LncRNA UCA1)/miR-590-3p轴对骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞炎症因子释放和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)表达的影响及机制。方法 采用RT-q PCR检测DDR2、LncRNA UCA1和miR-590-3p在OA软骨细胞和正常软骨细胞中的表达水平；在OA软骨细胞中分别转染sh-UCA1、miR-590-3p mimics、LV-UCA1和LV-UCA1+miR-590-3p mimics后实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测白介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor α,TNF-α)的表达水平，RT-qPCR和蛋白质印迹(western blot,WB)检测MMP-3和MMP-13的表达水平。双荧光素酶基因报告检测LncRNA UCA1和miR-590-3p的结合情况；RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)检测LncRNA UCA1与miR-590-3p和Argonaut-2蛋白(Ago-2)的结合情况。结果 在OA患者软骨细胞中DDR2和LncRNA UCA1的表达水平明显高于正常软骨细胞，miR-590-3p的表达水平明显低于正常软骨细胞。DDR2能够促进LncRNA UCA1的表达和抑制miR-590-3p的表达。双荧光素酶基因报告和RIP结果显示LncRNA UCA1能够通过ceRNA机制靶向抑制miR-590-3p的表达。低表达LncRNA UCA1和过表达miR-590-3p能够显著抑制IL-6、TNF-α、MMP-3和MMP-13的表达水平。过表达LncRNA UCA1能够显著促进IL-6、TNF-α、MMP-3和MMP-13的表达水平，同时过表达UCA1和miR-590-3p能够反转单独过表达LncRNA UCA1对OA软骨细胞炎症因子释放和MMPs表达的影响。结论 DDR2能够上调LncRNA UCA1,LncRNA UCA1通过ceRNA机制靶向抑制miR-590-3p，进而促进OA软骨细胞炎症因子释放和MMPs的表达。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 第一附属医院骨科