二种土甲族幼虫的分子鉴定

作者：张建英; 李彪; 贾龙; 丁荣荣

来源：农业科学研究, 2021, 42(03): 10-71.

DOI：10.13907/j.cnki.nykxyj.2021.03.002

• 土甲族
• COⅠ基因
• DNA条形码
• 快速鉴定

土甲族(Opatrini)是拟步甲科(Tenebrionidae)中较大的族之一,其昆虫是主要的农、林、牧业及仓储害虫。土甲族幼虫取食作物根部,对作物为害严重,然而由于其幼虫属间种间差异小,难以从形态上进行准确鉴定。以土甲族粗背伪坚土甲(Scleropatrum horridum horridum)和阿笨土甲(Penthicus alashanica)为研究对象,制成粗背伪坚土甲雌性成虫、雄性成虫、低龄幼虫、高龄幼虫和阿笨土甲雌性成虫、雄性成虫、低龄幼虫、高龄幼虫8个样品,分别提取8个样品的基因组DNA,再通过PCR技术扩增每个样品的COⅠ基因和16S基因序列,并分别进行同种及不同种COⅠ基因和16S基因序列比对分析,结果显示:粗背伪坚土甲和阿笨土甲16S基因序列相似性分别为100%、98.97%～99.56%,COⅠ基因序列相似性分别为98.49%～99.50%、98.63%～99.24%。种内最大差异均小于限值(2%),种间最小差异也明显高于限值(2%)。由结果可知:同种土甲成、幼虫相同基因序列的相似性均大于98%,分子鉴定结果与形态学鉴定结果一致,说明采用线粒体16S基因和COⅠ基因同时作为DNA条形编码的标记基因进行幼虫鉴定是可行的。本研究结果不但提供了一种鉴定幼虫的新方法,且获得的序列可用于粗背伪坚土甲和阿笨土甲各虫态的分子鉴定。DNA条形码技术可以弥补传统分类学在幼期标本鉴定上的短板,且快速、准确,可为虫害防治提供基础数据。

• 单位
  宁夏大学; 生命科学学院