产气荚膜梭菌α毒素基因PLC-Asp56定点突变及其特性鉴定

作者：陈乾坤; 李晓宇; 梅伟恒; 陈少坚; 许崇波^*

来源：广东化工, 2020, 47(02): 230-232.

• 产气荚膜梭菌
• α毒素
• 定点突变

本实验通过对A型产气荚膜梭菌α毒素PLC基因第56位氨基酸进行定点突变,将天冬氨酸Asp突变为丙氨酸Ala,构建了含有PLC-Asp56Ala突变基因的表达质粒,测序结果表明,重组质粒pPLC-Asp56Ala已经含有α毒素PLC基因的PLC-Asp56Ala突变基因。经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,PLC-Asp56Ala突变体蛋白含量占菌体总蛋白相对含量的22.48%。二级结构预测结果表明PLC-Asp56Ala突变体蛋白的二级结构第55位和第56位突变位点相对于α毒素由原来的无规则卷曲变成β转角。生物学活性检测表明PLC-Asp56Ala突变体蛋白已经完全丧失该酶活性。本研究结果可为今后对A型产气荚膜梭菌α毒素的致病机制的探究提供基础理论依据。

• 单位
  华南师范大学; 韶关学院; 生命科学学院