miR-145通过靶向吞噬和细胞活力蛋白1抑制乳腺癌细胞侵袭

作者：颜子千; 盛智梅; 邓梓坤; 张宝刚^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2019, 35(12): 1392-1399.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.11.1142

• 乳腺癌
• microRNA-145
• 吞噬和细胞活力蛋白1
• 侵袭

吞噬和细胞活力蛋白1(engulfment and cell motility protein 1,ELMO1)可以促进多种癌细胞的侵袭和转移,但ELMO1的表达是否受miRNA的调控鲜有研究。本研究旨在探讨miR-145与ELMO1表达的相关性,以及miR-145通过结合ELMO1的mRNA对乳腺癌侵袭的影响。通过TargetScan(http://www.targetscan.org/)靶基因预测软件预测与ELMO1的3′UTR结合的miR-145。荧光素酶结果证实两者互补结合。Transwell侵袭结果显示,miR-145组和siELMO1+miR-145组MDA-231乳腺癌细胞穿膜数较对照组分别降低40%(P<005)和79%(P<005)。siELMO1+miR-145组和siELMO1组细胞穿膜数则无显著差异(P>005)。结果提示,miR-145通过与ELMO1的mRNA结合抑制细胞侵袭。qRT-PCR显示,低侵袭的MCF-7乳腺癌细胞miR-145的表达量较高侵袭的MDA-435细胞高80%(P<005),较MDA-231乳腺癌细胞高75%(P<005),即miR-145与癌细胞侵袭能力呈负相关。Western印迹结果表明,miR-145组ELMO1表达量低于阴性对照组,miR-145抑制组ELMO1表达量高于抑制剂NC组(P<005),证明miR-145抑制ELMO1的表达。qRTPCR显示,过表达miR-145后ELMO1 mRNA含量与对照组无显著差异(P>005)。结果提示,miR-145对ELMO1的调控作用通过抑制其翻译实现。F-肌动蛋白聚合实验表明,miR-145组和阴性对照组于20 s和60 s时F-肌动蛋白聚合结果存在明显区别(P<005)。Western印迹结果表明,miR-145组活化的Rac1表达量较阴性对照组降低60%(P<005),抑制剂NC组活化的Rac1较miR-145抑制组降低55%(P<005);miR-145组磷酸化的整合素β1较对照组于15 min时降低42%(P<005),于30 min时降低31%(P<005)。由此得出的miR-145过表达显著促进乳腺癌细胞F-肌动蛋白聚合、Rac1活化和整合素β1磷酸化结论。综上所述,miR-145通过靶向ELMO1的mRNA抑制ELMO1翻译,从而抑制乳腺癌的侵袭。

• 单位
  潍坊医学院