BHK-21细胞蛋白样品双向凝胶电泳条件的优化

作者：卢国栋; 张克山; 刘永杰; 尚佑军; 郭建宏; 郑海学; 田宏; 刘湘涛

来源：中国兽医科学, 2011, (12): 1248-1252.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.12.003

• BHK-21细胞
• 口蹄疫病毒
• 双向凝胶电泳
• 条件优化 BHK-21 cell
• foot-and-mouth disease virus
• 2-DE
• condition optimization

分别从BHK-21细胞处理方法、样品上样量、聚丙烯酰胺凝胶浓度和染色方法4个方面优化了BHK-21细胞蛋白双向凝胶电泳的技术条件,以为口蹄疫病毒感染细胞比较蛋白质组学研究奠定基础。结果表明,处理细胞时,采用超声破碎方法优于反复冻融方法;用考马斯亮蓝染色时,7cm胶条上样量为100μg时图谱的蛋白点较多且分离清晰;浓度为10%的聚丙烯酰胺凝胶所得的蛋白点较多;通过2种染色方法的比较,硝酸银染色方法优于考马斯亮蓝染色方法。优化后的双向凝胶电泳技术得到的图谱,蛋白点多且清晰,重复性好,拖尾现象减少,符合软件分析的要求,可用于口蹄疫病毒感染BHK-21细胞蛋白质组学研究。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所