摘要
为了比较硝唑尼特在调控日本脑炎病毒(JEV)和脂多糖(LPS)诱导的炎症反应上的异同,分别用感染复数(MOI)=10的JEV和1μg/mL的LPS体外诱导RAW264.7细胞构建炎症模型并给予不同浓度的硝唑尼特处理。采用实时荧光定量PCR、Western blot和ELISA等方法检测硝唑尼特对病毒复制、多种炎性细胞因子以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路蛋白的调控情况。结果显示:JEV和LPS诱导后都能显著上调细胞内炎症因子的表达(P<0.01);给予硝唑尼特处理的细胞JEV复制减少,炎症因子如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的mRNA表达下降,但不能有效抑制JEV引起的细胞内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶2(COX-2)的表达,同时也不能下调磷酸化JNK蛋白(pJNK)的表达;而在LPS诱导的模型中,硝唑尼特对LPS引起的TNF-α、iNOS等炎症因子表达量升高具有显著的抑制作用(P<0.05),且能下调JNK蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。以上结果显示了硝唑尼特对JEV和LPS诱导的炎症反应都具有一定的抑制作用,但其调控炎症的方式存在较大差异,这为硝唑尼特通过调节天然免疫而发挥抗多种病原体的作用机制研究提供数据支持。
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