配对免疫球蛋白样受体B在小鼠树突细胞上的表达及其与免疫耐受关系的研究

作者：刘峥嵘; 张敏; 黎纬明; 周浩; 邹萍

来源：中华血液学杂志, 2007, 28(10): 689-693.

DOI：10.3760/j.issn:0253-2727.2007.10.011

• 树突细胞
• 免疫耐受
• 白细胞介素10
• 转化生长因子β
• 受体,配对免疫球蛋 白样
• RNA,小干扰

目的研究配对免疫球蛋白样受体 B(PIR-B)在小鼠树突细胞(DC)上的表达及其与免疫耐受的关系。方法 DC2.4为 C57BL/6小鼠来源的不成熟的 DC 株。脂多糖(LPS)刺激48 h 为成熟 DC(mDC)。分别以重组小鼠 IL-10(rmIL-10)、重组人转化生长因子β1(rhTGFβ1)诱导 DC2.4为耐受性 DC(T-DC),体外化学合成 PIR-B 特异性 RNA 小干扰分子(siRNA),以 Lip2000转染 DC2.4(si-DC),分别用半定量 RT-PCR、Western blot 检测 rmIL-10、rhTGFBl、LPS 及 PIR-B 特异的 siRNA 对 DC2.4上 PIR-B 表达的变化。以~3H-TdR 标记检测同种异体淋巴细胞反应(MLR),ELISA 法测定 MLR 上清中IFN-γ的水平变化。结果 RT-PCR、Western blot 结果显示 DC2.4表达 PIR-B mRNA 及蛋白相对值为0.51±0.08和0.58±0.23;mIL-10、rhTGFβ1诱导的 T-DC 上 PIR-B 的 mRNA 及蛋白表达相对水平均明显升高,相对值分别为0.85±0.07和0.87±0.14;0.79±0.10和0.85±0.34(P 值均<0.05),LPS刺激的 mDC PIR-B mRNA 及蛋白表达则降低(0.35±0.10和0.32±0.04,P<0.05),转染 PIR-B 特异性 siRNA 后 DC2.4上 PIR-B 的 mRNA 及蛋白表达水平也明显受抑,干扰48 h 后分别下降了78.9%和74.2%(P<0.05)。正常 DC2.4可以刺激异基因淋巴细胞增殖;LPS-DC 刺激异基因淋巴细胞增殖的能力明显增强,其反应体系中的 IFN-γ水平明显升高;T-DC 刺激淋巴细胞增殖的能力明显受到抑制,其反应体系中的 IFN-γ水平明显下降;而转染 PIR-B siRNA 后,DC 刺激淋巴细胞增殖的能力得到明显恢复,其反应体系中的 IFN-γ水平明显回升。结论高度表达免疫抑制性受体 PIR-B 是小鼠 DC 获得免疫耐受的共同特征及分子机制之一。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院