摘要
[目的]探究火龙果中miR164b及其靶基因NAC在应答非生物胁迫下的表达模式和调控机制。[方法]利用PCR技术克隆hpo-miR164b前体序列及HpNAC序列。采用在线网站对hpo-miR164b、HpNAC进行生物信息学分析,运用qRT-PCR方法探究hpo-miR164b及HpNAC在高温42℃、低温4℃、100 mmol/L NaCl及0.38 mmol/L ABA等非生物胁迫下的转录变化规律。[结果]获得长度为334 bp的hpo-MIR164b茎环前体,该序列可形成典型的茎环结构,hpomiR164b和hpo-miR164b*位于两个相反臂上; HpNAC基因的开放阅读框为1 092 bp,编码363个氨基酸,保守结构域NAM位于ORF的49-423 bp位置。qRT-PCR结果表明,在高温和高盐处理下,hpo-miR164b均上调表达;在低温处理下,hpo-miR164b先下调后上调;而在ABA处理下,hpo-miR164b上调表达。HpNAC的表达趋势则与hpo-miR164b相反。[结论]hpo-miR164对HpNAC基因具有负调控作用,且miR164-NAC在火龙果应答非生物逆境过程中发挥了重要作用。
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单位贵州大学; 生命科学学院