摘要
目的探讨肿瘤细胞来源的外泌体对神经母细胞瘤细胞增殖和转移的影响。方法使用外泌体提取纯化试剂盒对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞培养上清液中的外泌体进行提取和纯化, 通过透射电子显微镜、蛋白免疫印记法对外泌体的形态、大小和标志蛋白进行鉴定。根据细胞培养基中是否加入外泌体, 分为外泌体组和对照组, 利用CCK-8法和Transwell实验检测外泌体对SH-SY5Y增殖活力和转移能力的影响。结果在透射电子显微镜下可见外泌体为茶托样形状, 并被一层磷脂膜所包被, 直径在30~150 nm之间;蛋白免疫印记法显示, 位于外泌体内、外的标志蛋白TSG101和CD63均有富集。细胞增殖实验结果表明在共培养48 h后外泌体组的细胞存活率为(0.95±0.02)与对照组(0.88±0.05)比较, 差异无统计学意义(t=2.317, P=0.081 4);但是在共培养72 h后外泌体组的细胞存活率为(1.09±0.09)较对照组(0.92±0.03)明显提高, 且组间差异有统计学意义(t=3.027, P=0.038 9)。细胞转移实验结果显示, 外泌体组SH-SY5Y细胞的迁移数量为(28.8±5.02)个较对照组(14.8±4.76)个明显增加, 且组间差异有统计学意义(t=4.523, P=0.001 9)。结论神经母细胞瘤细胞来源的外泌体能促进肿瘤细胞的增殖和转移, 表明肿瘤来源的外泌体能成为交叉信号传递的平台, 在促进肿瘤细胞生长方面发挥自分泌的作用。
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单位青岛大学附属医院; 青岛大学; 青岛市妇女儿童医院