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摘要
以1株具有潜在益生功效的Lactobacillus plantarum HNU082为例,采用传统选择性分离培养和基因组学技术相结合的研究方法,从菌株定性研究角度,首先基于L. plantarum HNU082全基因组序列通过比较基因组学方法筛选获得该菌株的特异性片段,设计引物与其他L. plantarum菌株共扩增进行菌株特异性引物的筛选和验证。其次,基于菌株全基因组抗性基因的注释选取相应抗生素进行验证,使其更容易从宿主肠内容物中实现分离。通过选择性培养基的分离和特异性引物的验证完成菌株的定性分析。同时,基于菌株特异性引物,通过实时聚合酶链式反应技术完成菌株拷贝数的定量研究。最后,通过1例大鼠实验验证了本方法的可行性和准确性。基于此,建立了L. plantarum HNU082菌株在肠道内的定性定量研究方法。本研究建立完善的宿主肠道内L. plantarum HNU082定性定量研究方法,将为益生乳杆菌的体内研究提供重要方法学支持。
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