抑制miR-21表达的腺病毒载体构建、病毒包装及其对HepG2细胞的作用

作者：张一琳; 汤建中; 刘宏鹏; 张兆波; 徐文锦; 魏军; 徐广贤

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (12): 1265-1268+1272.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006630

• miRNA sponge
• miR-21
• 重组腺病毒 miRNA sponge
• miR-21
• recombinant adenovirus

目的:构建能高效抑制成熟miR-21小分子表达的腺病毒载体,探讨其对肝癌细胞株HepG2的影响与机制。方法:基于miRNA sponge技术,合成一段与miR-21序列完全互补的8个重复片段,克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,经酶切、测序鉴定正确无误后,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒进行同源重组,转染至293A细胞中,包装成重组腺病毒感染HepG2细胞,通过Hochest33258染色、Western blot法及MTT试验检测细胞的凋亡与增殖水平。结果:经酶切、测序及GFP表达证实,成功构建了携带与miR-21互补的DNA片段的重组腺病毒。经Hochest33258染色、West...

• 单位
  宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院