人乳头瘤病毒16型表位嵌合病毒样颗粒的构建及免疫原性研究

作者：郭健; 张力; 陈力源; 李玉华; 杨皓杰; 田一凡; 朱洁; 刘微^*

来源：中国人兽共患病学报, 2020, 36(09): 689-695.

• HPV16
• 嵌合病毒样颗粒
• E7蛋白
• 宫颈癌疫苗
• 体液和细胞免疫

目的制备E749-57表位嵌合病毒样颗粒,并进行免疫原性分析。方法利用分子模拟软件Discovery Studio预测HPV16 L1的E749-57最佳嵌合位点,将E749-57表位嵌入预测位点。构建pET28a-16L1-E749-57重组质粒,于大肠杆菌中诱导表达HPV16L1-E749-57蛋白并利用镍柱进行亲和层析纯化。于体外重组VLPs后,进行动态光散射粒径和透射电镜分析。用E749-57嵌合VLPs免疫小鼠,假病毒中和试验检测免疫血清中和抗体滴度。流式多因子法检测Th1和Th2型细胞因子水平。结果 HI loop区355/356为最佳表位嵌合位点。正确表达了HPV16 L1-E749-57蛋白并组装E749-57嵌合VLPs。E749-57嵌合VLPs免疫小鼠3次后,小鼠血清中和抗体滴度log10平均值达到4.23,略低于野生型VLPs(log10平均值为4.45)。但是,相对于野生型VLPs,E749-57嵌合VLPs诱导产生Th1型细胞因子(INF-γ, IL-2, TNF-α)的水平显著提高。结论本研究制备的E749-57嵌合VLPs能刺激机体同时产生较强的体液和细胞免疫应答,可能兼具预防和治疗双重功效,为宫颈癌治疗性疫苗的研制奠定基础。

• 单位
  生命科学学院; 吉林大学; 吉林医药学院; 吉林市中心医院