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摘要
目的由于纳米抗体在抑制肿瘤及其他方面的显著功能,新型纳米抗体的研发正在受到高度重视。在纳米抗体研发中必须建立生物活性等功能的分析方法评估其生物活性。本文以抗VEGFR2纳米抗体作为模型纳米抗体,建立以HT-29细胞为实验对象的体外生物学活性实验,以建立整套生物活性分析方法的平台。方法在抗肿瘤活性试验中建立了CCK-8杀伤实验、细胞划伤愈合实验、和免疫印迹分析法,对纳米抗体试验品进行生物学及生物化学的分析。结果在HT-29细胞中,抗VEGFR2纳米抗体的细胞杀伤率达到588nM,细胞划伤愈合率为9.37%,在免疫分析方法中酪氨酸磷酸化水平呈剂量依赖性降低。结论 CCK-8杀伤实验,细胞划伤愈合实验和免疫印迹分析法可在体外证明药物的生物学活性。
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