摘要
目的 探讨PM2.5致人支气管上皮(human bronchial epithelial,HBE)细胞的毒性作用及可能机制。方法 探讨200μg/ml PM2.5混悬液染毒不同时段(0、1、3、6、12、24 h)对HBE细胞存活率和磷酸化核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB) p65蛋白表达水平的影响;检测PM2.5染毒不同时段后稳定转染了NF-κB反应元件调控的荧光素酶报告基因质粒的HBE细胞(HBE/NF-κB细胞)的荧光素酶活力;测定PM2.5染毒3 h后HBE细胞活性氧自由基(ROS)、细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的水平以及NF-κB信号通路相关基因的差异表达。结果 PM2.5混悬液染毒不同时段均能降低细胞存活率,24h时降低趋势最明显,差异有统计学意义(P<0.05),仅为对照组的76.72%。在HBE/NF-κB细胞中,除PM2.5混悬液染毒12 h组外,其他各组均可诱导荧光素酶活力明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。除PM2.5混悬液染毒12 h组外,其他各组HBE细胞磷酸化NF-κB p65蛋白水平均呈升高趋势,其中染毒3 h组变化最明显,差异有统计学意义(P<0.05),此变化与HBE/NF-κB细胞荧光素酶活力变化趋势基本一致。PM2.5染毒3 h后,细胞内ROS和细胞上清液中IL-6和IL-8水平均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),且PM2.5染毒组共有12个NF-κB信号通路相关差异基因表达,其中上调的基因有9个,下调的基因有3个。结论 HBE/NF-κB细胞可初步用于PM2.5致细胞炎症反应的快速评估,PM2.5暴露可诱导HBE细胞产生氧化应激与炎症反应,且可能与NF-κB信号通路改变有关。
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单位公共卫生学院; 苏州大学; 苏州市疾病预防控制中心