科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的:研究干扰素α2b抑制小鼠肾癌生长及其潜在的作用机制。方法:建立肾癌移植瘤模型,干扰素干预后将肾癌移植瘤模型分为对照组和干扰素α2b组,监测各组小鼠移植瘤体积与重量,切取移植瘤作HE染色,免疫组织化学检测移植瘤蛋白BCL-2表达;超滤加蔗糖重水密度梯度离心法提取外泌体,透射电镜鉴定外泌体形态及数量的变化;流式细胞术检测小鼠骨髓中髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)比例,小鼠脾脏CD4/CD8T淋巴细胞比例。建立BALB/c小鼠实验模型,将其分为生理盐水组、外泌体组和Renca细胞组,建模后第10、20、30天应用流式细胞仪检测各组小鼠骨髓MDSCs比例。结果:成功建立肾癌移植瘤模型与BALB/c小鼠实验模型,在肾癌移植瘤模型实验中,与对照组比较,干扰素α2b组重量与体积明显被抑制(P<0.01)。HE染色结果显示:肿瘤组织中细胞大小不均,形态不一,排列紊乱;细胞核增大,核质比例失常,核深染,异常核分裂。免疫组织化学检测显示:对照组为、干扰素α2b组两组间Bcl-2蛋白阳性表达率无统计学差异(P>0.05)。成功分离并纯化外泌体,对照组、干扰素组2组外泌体形态并无统计学差异(P>0.05);与对照组比较,干扰素α2b能明显减少Renca细胞分泌的外泌体数量(P<0.01)。与对照组比较,干扰素α2b组MDSCs比例明显降低(P<0.05),与对照组相比,干扰素组荷瘤小鼠CD4/CD8T淋巴细胞比例(P<0.05)明显升高。在BALB/c小鼠实验模型实验中,在第10天、20天和30天,与生理盐水组相比,外泌体组与Renca细胞组的MDSCs比例明显增高(P<0.01),而外泌体组与Renca细胞组比较无统计学差异(P>0.05)。外泌体组与Renca细胞组内,第20天和30天比第10天要明显增加MDSCs比例(P<0.05),第20天和30天之间MDSCs比例无明显变化(P>0.05)。而生理盐水组MDSCs比例在第10、20和30天之间比较无统计学差异(P>0.05)。结论:干扰素α2b通过抑制Renca细胞分泌外泌体,而Renca细胞来源外泌体在体内参与了小鼠MDSCs的活化、增殖,致使MDSCs的活化、增殖受限,从而抑制小鼠肾癌生长。
-
单位重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学
