摘要

目的探讨微小RNA-195(miR-195)在胃癌干细胞中的作用及其调控机制。方法通过干细胞标记物CD44分选胃癌干细胞,采用实时定量PCR方法检测胃癌干细胞中miR-195 mRNA表达。使用慢病毒表达载体构建miR-195稳定表达细胞系,采用体外成球实验和Transwell实验检测其自我更新能力和侵袭能力,生物信息学进行miR-195靶基因预测,Western blot法检测Akt3蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-195靶基因。结果与CD44-胃癌细胞相比,miR-195在CD44+胃癌细胞中的表达下调(P<0.01)。过表达miR-195后,Oct4、Sox2和Nanog mRNA表达降低,成球能力和侵袭能力被抑制(P<0.05或P<0.01)。生物信息学分析预测miR-195候选靶基因为Akt3;Western blot法检测过表达miR-195后的Akt3蛋白表达降低(P<0.05);而双荧光素酶报告基因实验验证Akt3并非miR-195的直接靶基因。结论 MiR-195可能通过非靶向调节Akt3的方式抑制胃癌干细胞的干性特征和侵袭能力,为胃癌治疗提供了一个潜在靶点。