摘要
为了促进麦胚的高值化利用,本文通过建立H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞-破骨细胞共育体系氧化应激模型探究了麦胚源活性肽(ADWGGPLPH)对成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC)活性的影响。利用流式细胞术、MTT增殖实验、FITC/PI双染等方法,明确麦胚源活性肽对氧化应激环境中OB增殖和凋亡的作用。利用碱性磷酸酶(ALP)活性检测、酶联免疫吸附测定(ELISA)以及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色等方法研究麦胚源活性肽对氧化应激共育体系中OB和OC分化活性的影响。结果显示,麦胚源活性肽能够有效抑制氧化应激共育体系中OB内活性氧(ROS)的增加,并通过抑制丙二醛(MDA),促进谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,提高OB免受自由基攻击以及清除自由基的能力。麦胚源活性肽可显著抑制氧化应激共育体系中OB凋亡(例如,FITC/PI双染结果显示凋亡率由12.4%下调至5.3%,p < 0.01;),OB细胞活力由60.4%提高至92.8%(p < 0.01),改善了OB的增殖水平。此外,麦胚源活性肽对成骨细胞早期分化活性指标ALP、蛋白I型胶原(COL-I)以及晚期分化活性指标骨钙素(OCN)的下降具有良好的改善作用,OB矿化率从21.3%提高至84.3%(p < 0.01),从而使成骨细胞发挥良好的分化活性和矿化功能。TRAP染色结果显示麦胚源活性肽也能有效抑制氧化应激造成的OC过度分化(OC相对阳性面积从376.4%下调至128.1%,p < 0.01)。综上,麦胚源活性肽对H_(2)O_(2)诱导的OB-OC共育体系中细胞氧化损伤具有保护作用,从而维持良好的细胞稳态,为麦胚蛋白的开发利用提供了重要的理论参考。
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