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摘要
目的探究Akkermansia muciniphila(AKK)对葡聚糖硫酸钠溶液(DSS)诱导的小鼠模型的影响。方法无特定病原体(SPF)级C57BL/C雄性小鼠30只, 依次分为空白组、结肠炎组、AKK+结肠炎组。观察每组小鼠的日常活动量、排便情况, 选择疾病活动指数(DAI)进行疾病活动度评估, 收集粪便行粪便做隐血试验等, 在建模结束7 d后采用断头法处死小鼠, 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量, 苏木精-伊红(HE)检测结肠病理结构, 蛋白质印迹法(Western blot)检测结肠黏膜中紧密连接蛋白Occludin-1的表达, 二喹啉甲酸(BCA)法测定结肠组织二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸的浓度。采用单因素方差分析(one-way ANOVA)进行统计分析, 组间两两比较用LSD-t或Tamhane’s T2法进行显著性分析。结果第3、7、21天空白组的体重分别为(17.01±1.30)、(19.77±1.85)、(21.07±1.80) g, 结肠炎组的体重分别为(15.67±0.65)、(13.66±0.62)、(11.72±0.53) g, AKK+结肠炎组的体重分别为(15.74±1.43)、(15.14±1.31)、(13.37±1.46) g, 第3天结肠炎组的体重有低于AKK+结肠炎组的趋势, 但差异无统计学意义(LSD-t=0.133, P>0.05), 第7天及第21天时结肠炎组及AKK+结肠炎组体重显著低于空白对照组(LSD-t=10.061、15.272, P<0.01), 结肠炎组低于AKK+结肠炎组(LSD-t=2.436、2.706, P<0.05)。第3、7、21天空白组的DAI指数均为0, 结肠炎组的DAI指数分别为1.25±0.06、2.26±0.13、3.13±0.08, AKK+结肠炎组的DAI指数分别为0.89±0.43、1.53±0.05、2.45±0.10, AKK+结肠炎组DAI评分低于结肠炎组(LSD-t=3.242、20.444、2.027, P<0.05)。HE结果显示结肠炎组隐窝排列不规则、炎症细胞浸润、肠腺水肿, AKK菌灌胃后, 结肠水肿和出血减轻, 肠腺结构清晰, 空白组、结肠炎组、AKK+结肠炎组的病理评分分别为(0.76±0.03)、(4.07±0.05)、(2.82±1.03)分, AKK+结肠炎组高于空白组、低于结肠炎组(LSD-t=13.208、5.985, P<0.05)。结肠炎组中IL-1β、IL-6、TNF-α分别是(8.61±3.06)、(5.58±2.23)、(55.68±18.57) pg/ml, 明显高于空白组(Tamhane’s T2=6.584、7.175、9.239, P<0.01), 与结肠炎组相比, AKK+结肠炎组IL-1β、IL-6、TNF-α表达下降, 分别是(5.51±2.32)、(3.12±0.89)、(20.94±8.05) pg/ml(Tamhane’s T2=3.047、3.667、6.617, P<0.05)。结肠炎组中Occludin-1、D-乳酸、DAO分别是(615.56±41.87) ng/ml、(4.37±0.15) μg/ml、(8.93±0.07) ng/ml, 明显高于空白组(Tamhane’s T2=19.059、36.071、23.676, P<0.01), 与结肠炎组比较, AKK+结肠炎组Occludin-1、D-乳酸、DAO分别是(887.55±42.48) ng/ml、(3.57±0.20) μg/ml、(7.41±0.07) ng/ml。与结肠炎组相比, 差异有统计学意义(Tamhane’s T2=14.421、47.183、1.020, P<0.01)。结论 AKK菌可降低IL-1β、IL-6、TNF-α含量, 通过调控Occludin-1等结肠紧密连接蛋白, 从而降低结肠炎的严重程度, 增强结肠的屏障功能。
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单位福建医科大学附属第一医院; 福建医科大学; 第一临床医学院
