龙葵愈伤组织生长特性及次生代谢产物积累研究

作者：陈媛媛; 刘秀岩; 刘福顺; 杨世海^*

来源：中草药, 2022, 53(16): 5170-5178.

• 龙葵
• 愈伤组织
• 增殖
• 生理特性
• 次生代谢产物
• 澳洲茄碱
• 澳洲茄边碱

目的 建立龙葵Solanumnigrum愈伤组织最优培养体系，研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累，为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法 研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响，采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比，运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量，TTC还原法测定细胞活力，邻苯二酚法测定多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性，氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，愈创木酚比色法测定过氧化物酶（peroxidase,POD）活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量，高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果 愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段，最适培养基为MS+1.43 mg/L NAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT，愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势，20 d时细胞活力达到最高峰值，可溶性蛋白含量与POD活性均呈先升高后降低的趋势，SOD活性在20 d与30 d出现2个峰值，MDA含量呈先降低后升高的变化趋势，在培养后期PPO活性下降，可能与愈伤组织褐化有关，澳洲茄碱与澳洲茄边碱含量变化趋势一致，在第30天时达到峰值。结论 龙葵愈伤组织生长期为25 d，同时也为最适的愈伤组织鲜质量收获期，25 d后会出现不同程度褐化。其愈伤组织中的次生代谢产物积累和细胞生长过程通常是负相关的，次生代谢产物的合成大多在愈伤组织的生长后期。

• 单位
  吉林农业大学; 国家中医药管理局