摘要

目的构建鼠野生型肿瘤坏死因子(Wild type tumor necrosis factor-alpha,wtTNF-α)和跨膜型肿瘤坏死因子(Transmembrane tumor necrosis factor-alpha,tmTNF-α)基因真核表达载体,转染心肌细胞,比较两型TNF-α对心肌细胞凋亡的影响。方法应用RT-PCR方法从小鼠腹腔巨噬细胞中扩增wtTNF-α基因编码区,根据小鼠TNF氨基酸序列设计缺失肿瘤坏死因子转化酶(TNF alpha converting enzyme,TACE)作用位点(缺失1-12位氨基酸)的突变引物,通过重叠PCR得到构建不被TACE剪切的TNF-...

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