摘要

目的探讨长非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1(AFAP1-AS1)对结肠癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(q PCR)检测本院手术切除的30例结肠癌组织相对于癌旁组织及结肠癌细胞(SW620、HT-29、HCT116、Caco-2和SW480)相对于人正常结肠上皮细胞NCM460的AFAP1-AS1水平。脂质体介导AFAP1-AS1特异性干扰RNA (siRNA)转染SW480细胞(si-AFAP1-AS1组)并设转染无关siRNA的SW480细胞为si-NC组和未行转染的SW480细胞为对照组,q PCR、MTT比色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测AFAP1-AS1水平、增殖活力和凋亡率,q PCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3、p-PI3K和p-Akt水平。结果结肠癌组织的AFAP1-AS1水平为2.669±0.171,高于对应癌旁组织的1.381±0.085(P<0.05)。结肠癌细胞的AFAP1-AS1水平均高于NCM460细胞(P<0.05),选取AFAP1-AS1水平最高的SW480细胞进行后续功能实验。si-AFAP1-AS1组SW480细胞的AFAP1-AS1水平和增殖活力均低于si-NC组和对照组(P<0.05)。si-AFAP1-AS1组SW480细胞的凋亡率为(19.486±0.674)%,高于对照组的(10.671±1.025)%和si-NC组的(10.224±0.683)%(P<0.05)。与对照组和si-NC组相比,si-AFAP1-AS1组的p-Akt、p-PI3K和Bcl-2水平降低,而Bax和caspase-3水平升高(P<0.05)。对照组和si-NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论结肠癌中高表达的AFAP1-AS1可能通过激活PI3K/Akt通路来促进结肠癌细胞增殖并抑制凋亡,发挥促癌功效,AFAP1-AS1有可能成为结肠癌治疗的新靶点。

  • 单位
    东南大学附属中大医院