结核分枝杆菌ESAT-6基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

作者：付小强; 吴少庭; 黄汉菊; 甘燕; 李晓恒

来源：中国人兽共患病学报, 2007, (08): 745-748.

DOI：10.3969/j.issn.1002-2694.2007.08.002

• 结核杆菌
• ESAT-6
• 耻垢分枝杆菌
• 重组BCG Mycobaterium tuberculosis
• ESAT-6
• Mycobacterium smegmatis mc2 155
• Recombinant BCG

目的体外扩增结核杆菌ESAT-6基因,并构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-ESAT-6和重组耻垢分枝杆菌。方法采用聚合酶链式反应(PCR)方法,体外扩增结核杆菌ESAT-6基因,克隆入pGEMT载体。然后,构建亚克隆ps3000-ESAT-6大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒,经电转化方法,将ESAT-6基因的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌(Mycobacteri-umsmegmatis mc~2155)中,热诱导此重组耻垢分枝杆菌,用SDS-PAGE电泳观察ESAT-6蛋白的表达,Western blotting鉴定其生物学活性。结果成功扩增了结核杆菌ESAT-6基因;正确构建穿梭质粒ps30...

• 单位
  深圳市疾病预防控制中心; 华中科技大学同济医学院