列当中Crenatoside神经保护作用的机制研究

作者：韩雪峰; 苗鑫; 刘丹丹; 张晓菲; 邢海燕; 李刚^*

来源：中医药学报, 2018, 46(06): 27-32.

DOI：10.19664/j.cnki.1002-2392.180174

• 列当中Crenatoside
• PC12细胞
• cAMP/PKA/CREB信号通路
• D-半乳糖

目的:从列当中苯乙醇苷类成分Crenatoside(OC4)对D-半乳糖所致急性损伤的保护作用中,探讨调节cAMP/PKA/CREB信号通路的机制。方法:(1)根据MTT法检测细胞存活率确定给药OC4的剂量,以及D-半乳糖诱导PC12神经细胞损伤模型的剂量和作用时间。OC4孵育24 h后,ELISA法检测cAMP、PKA和BDNF的含量;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量; Western Blotting免疫印迹分析检测CREB、p-CREB蛋白的表达水平。结果:给予PC12细胞16 g/L D-半乳糖40h后,MTT检测细胞存活率达(46. 67±6. 59)%,与对照组比较差异具有显著性意义(P <0. 05),表明成功建立了细胞衰老模型。OC4作用24 h后,与D-半乳糖组相比,PKA、cAMP、BDNF和SOD水平提高(P <0. 05),MDA和LDH水平下降(P <0. 05)(r MDA=-0. 850,P <0. 05);(r LDH=-0. 927,P <0. 05),p-CREB表达增加(P <0. 05),并且有剂量依赖性(r=0. 903,P <0. 01)。PKA特异性抑制剂H-89作用1 h后,p-CREB表达减少,PKA、cAMP、BDNF和SOD水平显著降低(P <0. 05),MDA和LDH水平升高(P <0. 05)。结论:列当中Crenatoside对D-半乳糖诱导的PC12神经细胞损伤有明显的保护作用,其机制与上调cAMP/PKA/CREB信号通路有关。

• 单位
  内蒙古人民医院; 内蒙古医科大学