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摘要
试验旨在建立并鉴别猪腹泻性疾病病原并为临床检测提供简单快捷的方法，针对PEDV-N基因、TGEV-S基因、PoRV-VP6基因设计特异性引物，结合细菌通用引物16s rRNA建立多重PCR方法，检测来自四川省凉山彝族自治州的某规模猪场腹泻仔猪和母猪11份样品（粪便和小肠）并将扩增产物进行测序验证。结果显示：经过优化反应条件成功建立起多重PCR检测方法；所建立的方法能够特异性扩增猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PoRV）和细菌感染，与猪的其他病毒无交叉反应；对PEDV、TGEV、PoRV和细菌的最低检出下限均为1.72×103 copies/μL，特异性、敏感性、重复性好。临床11份样品检测结果为哺乳仔猪和母猪感染PEDV，其中4头母猪存在细菌混合感染；测序结果验证了11份腹泻样品均为PEDV感染，4头母猪细菌混合感染为恶臭假单胞菌。研究表明，所建立的多重PCR方法可用于PEDV、TGEV、PoRV和细菌的临床检测和流行病学调查，为临床中区别由病毒或细菌引起的猪腹泻提供一定诊断价值。
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